當涉及液體介質(zhì)的蒸汽滅菌時，存在許多以各種方式處理的用戶顧慮。使用生物指示器（BI）監(jiān)測這些循環(huán)以及所做的各種限制和循環(huán)修改可能導致假陽性或失敗循環(huán)。以下是用戶對液體介質(zhì)蒸汽滅菌的一些循環(huán)修改或限制：
使用者需要在消毒過程中將培養(yǎng)瓶保持在容器中，因此沸騰不會遍布高壓
滅菌器。
根據(jù)制造商的說明，用戶需要在121°C下對介質(zhì)進行15分鐘的滅菌。用戶無法找到在此短周期內(nèi)死亡的BI。
由于介質(zhì)對熱敏感，因此用戶無法運行更長的循環(huán)時間，如果使用更長的循環(huán)時間，則可能無法促進增長。
用戶的協(xié)議規(guī)定僅在15分鐘，121°C的循環(huán)中運行。
用戶已確定1L TSB瓶的循環(huán)暴露時間。現(xiàn)在，2升燒瓶應(yīng)該用什么時間; 我加倍的時間？
當使用液體負載時會出現(xiàn)許多獨特的問題，如果循環(huán)用于硬質(zhì)貨物或包裝貨物，則永遠不會出現(xiàn)。大多數(shù)項目不會對溫度敏感，因此不必擔心BI放置的沸騰或質(zhì)疑。然而，對于液體負載，不需要將真**空氣去除或蒸汽滲透到多孔負載中。
驗證負載配置：
那么，為什么液體培養(yǎng)基滅菌和BI殺傷力會出現(xiàn)這么多問題呢？用于解決上述問題的一些方法實際上可能導致失敗的周期或BI為正的周期。這很大程度上是由于許多診所，大學或醫(yī)院中使用的大多數(shù)液體負載/介質(zhì)循環(huán)配置未經(jīng)驗證的事實。驗證負載配置周期提供了“獲取，記錄和解釋確定過程將始終如一地產(chǎn)生符合預定規(guī)格的產(chǎn)品所需結(jié)果的文檔化程序”（ISO / TS 11139：2006，定義2,55 2）在消毒介質(zhì)中，期望的結(jié)果是產(chǎn)生具有某些品質(zhì)的培養(yǎng)基，例如pH范圍，生長促進能力和不育性。
執(zhí)行液體滅菌驗證：
當對要使用的所選曝光時間/溫度液體介質(zhì)循環(huán)進行驗證時，需要確定從循環(huán)開始到使介質(zhì)達到121℃所需的時間。這將被記錄為該特定周期所需的“上升”時間。如果使用1L培養(yǎng)基培養(yǎng)基完成，則需要對包括更大體積（例如2L培養(yǎng)瓶）的循環(huán)進行單獨驗證。為了確定裝載兩個1L TSB燒瓶的“啟動”時間，可以將溫度記錄儀放入每個培養(yǎng)基瓶中以記錄整個循環(huán)持續(xù)時間內(nèi)的培養(yǎng)基溫度。該活性將重復至少兩個循環(huán)，每個循環(huán)含有新制備的培養(yǎng)基燒瓶。所有三個周期的“出現(xiàn)”時間應(yīng)非常相似。例如，如果
現(xiàn)在有數(shù)據(jù)支持，在特定介質(zhì)的一定數(shù)量的1L燒瓶的情況下，介質(zhì)的溫度將在循環(huán)開始的16分鐘內(nèi)達到121℃。應(yīng)記錄燒瓶的數(shù)量和每個燒瓶的體積以及它們在高壓滅菌室內(nèi)的位置，并且除非使用其他放置區(qū)域或更少的燒瓶進行繼續(xù)驗證，否則在將來使用的其他循環(huán)中必須保持相同。有必要驗證zui壞情況的負載，以便能夠預先確定所有其他負載在指定的16分鐘“上升”時間內(nèi)也將達到121°C的溫度。
使用數(shù)據(jù)記錄器：
一個非常容易使用的熱敏電阻或數(shù)據(jù)記錄器，用于在滅菌周期內(nèi)記錄介質(zhì)的溫度，可以很容易地放在實際的介質(zhì)瓶內(nèi)。通過這樣做，可以確定正在消毒的實際溫度。將數(shù)據(jù)記錄器放置在高壓釜室內(nèi)的架子上將不會顯示在培養(yǎng)瓶內(nèi)實際發(fā)生的情況。記錄儀實際上必須放在介質(zhì)瓶內(nèi)。
在較長周期內(nèi)運行媒體可能不會對媒體和增長促進能力產(chǎn)生不利影響。畢竟，運行35分鐘的周期需要20分鐘的啟動時間實際上是在121°C下的15分鐘周期。如果擔心周期長度，請運行周期，然后測試介質(zhì)并驗證它是否仍按預期執(zhí)行，并且增長促銷沒有受到影響。
每個瓶中運行不同的容量或在一個循環(huán)中運行不同數(shù)量的燒瓶是需要進行額外驗證工作的情況。運行1L燒瓶可能需要35分鐘的循環(huán)，其中幾個2L燒瓶可能需要額外的時間用于上升，并且可能需要45分鐘或更長時間。通過使用數(shù)據(jù)記錄器，可以輕松確定將不同體積的介質(zhì)達到121°C所需的各種曝光時間。
