1 脈動真空滅菌器作業(yè)原理與特色
1.1  脈動真空滅菌器作業(yè)原理
脈動真空式滅菌體系介于滅菌重力轉(zhuǎn)換式器和高真空式滅菌器之間。
典型的蒸汽脈沖程序：在接連進蒸汽條件下，抽真空到10.7～13.3 kPa(80～100 mmHg)的肯定壓力，重復2～3 次；或抽真空到10.7～13.3 kPa(80～100 mmHg)的肯定壓力后，進一次蒸汽(一個蒸汽脈沖)，重復2～3次，從而使腔體內(nèi)反復通入無熱原蒸汽，到達腔內(nèi)及滅菌物品冷空氣的有用置換，使腔內(nèi)無冷點。當腔內(nèi)壓力穩(wěn)定時，滅菌蒸汽均勻地散布在腔內(nèi)滅菌物品的有用部位進行徹底滅菌，確保了滅菌作用。接連進蒸汽有利于避免和降低物品中空氣的殘留量。脈動真空滅菌器腔室中的溫度-壓力曲線如圖2所示。當然，假如因被滅菌物品性質(zhì)對比特別而有必要時，可選用3 次以上的蒸汽脈沖和抽真空過程。制藥企業(yè)常用的滅菌器一般屬脈動式滅菌器，滅菌程序完成后，還需檢漏，因而需進行相應的功用設置。 

1.2  脈動真空滅菌器特色
shou要長處：(1)滅菌周期短；(2)不需求高的真空度；(3)空氣滯留疑問小；(4)小裝量條件下仍有好的滅菌作用。
shou要缺點：(1)被滅菌品裝載過密時，滅菌作用差；(2)在真空度規(guī)模內(nèi)，實現(xiàn)蒸汽脈沖需求較雜亂的輔助設備(如真空泵、冷凝器、噴射泵等)，從而給修理和養(yǎng)護增加了難度。
2 設備運用中常見疑問及解決辦法
2.1 PLC毛病和觸摸屏的黑、白屏景象
目前，在配有觸摸屏式的脈動真空滅菌器傍邊≥3.5 m3的設備中易發(fā)作PLC毛病和觸摸屏的黑、白屏景象。
發(fā)作此景象的要素：(1)PLC、觸摸屏自身的要素，如元件老化、DC24 V電源毛病等；(2)在滅菌完成后開門時，滅菌器內(nèi)的蒸汽剎那間串出，與房間內(nèi)空氣觸摸構(gòu)成水蒸汽，對滅菌器的電路有些尤其是觸摸屏、PLC影響較大，容易發(fā)作受潮短路。
解決辦法：如元器件自身要素，可替換元器件，或選用加大滅菌器柜門上方的排潮電機功率、異地操控等辦法。
2.2 真空泵繼續(xù)作業(yè)負壓不降低
發(fā)作此景象的要素：(1)真空泵自身的要素如真空泵動能降低、真空泵回轉(zhuǎn)；(2)總水壓過低 (＜0.1 MPa/cm2)；(3)水流速太小或自來水管道管徑太細等。
解決辦法：(1)對于客觀要素給予替換部件，如真空泵、水壓表、自來水管；(2)滅菌器自來水管**佳獨自一管道,并在水壓力表旁裝置水流量表,以隨時觀察水壓及水流速,避免因水流太小負壓不降低,使真空泵產(chǎn)生干抽景象導致部件損壞。
2.3 滅菌器密封門打不開
發(fā)作此景象的要素：(1)閨閣有正壓或負壓；(2)門密封膠條沒抽回；(3)程序在運轉(zhuǎn)；(4)門電機發(fā)動電容損壞；(5)門內(nèi)傳動體系損壞等。
解決辦法：(1)待室內(nèi)壓力回0后，再開門；(2)查看真空泵是不是抽暇，門密封管路是不是堵塞，泵是不是回轉(zhuǎn)，是不是有水；(3)退出滅菌程序；(4)替換門電機發(fā)動電容，查看門電機；(5)查看門內(nèi)傳動體系。
3 影響滅菌作用的要素
3.1 物理/化學條件
在細菌構(gòu)成芽孢過程中的多種環(huán)境要素會影響孢子的耐熱性。例如，溫度較高并有二價陽離子(如Ca2+ 、Fe2+ 、Mg2+ 、Mn2+)存在時，芽孢的耐熱性增強。與此相反，當pH 超出6.0～8.0 的規(guī)模時，或在高濃度的鹽水或磷酸鹽中構(gòu)成芽孢時，其耐熱性降低。
自然界中芽孢的耐熱性與環(huán)境條件有關(guān)，如溶液濃度、水分、pH、對芽孢有損害作用的物理要素以及對芽孢有抑制作用的化學品等，均會影響芽孢的耐熱性。
包藏在晶體或有機物內(nèi)的芽孢，其耐熱性一般顯著高于一般非包藏態(tài)的芽孢。因而，在某一溫度條件下，將泥土包藏性芽孢和從泥土分離并培育得到的芽孢一起滅菌時，要想取得一樣的滅菌作用，同一滅菌溫度下，前者所需的滅菌時刻比后者要高出10多倍。因為被滅菌品受到了泥土中芽孢的污染，如在運送處理中被未經(jīng)過濾空氣微粒污染，或許因人員或別的物品觸摸遭受污染時，要將芽孢徹底殺滅會很困難。正因為如此，GMP請求采納全部必要的辦法避免污染。
3.2 相對濕度
在熱力滅菌中，水對殺滅細菌芽孢起著shou要作用。與水有關(guān)的滅菌方法只要2種：濕熱和干熱。濕度到達飽滿[相對濕度(RH)為 100％(或 aw＝1.0)]時的滅菌方法稱為濕熱滅菌；相對濕度低于100％條件下的滅菌方法統(tǒng)稱干熱滅菌。實驗數(shù)據(jù)標明，溫度在90～125 ℃之間，相對濕度在20％～50％時，細菌芽孢較難殺滅；當相對濕度高于50％或低于20％時，則較易殺滅。這對挑選滅菌條件具有指導意義。
3.3 曝熱時刻
滅菌過程中，原核細胞的逝世(被殺滅)遵從一級反響的規(guī)則。溫度與某一時刻芽孢存活對數(shù)間的關(guān)系，在很多情況下呈線性。這就是說，在特定的滅菌溫度下，任一時刻孢子逝世僅與這個時刻孢子的濃度有關(guān)，而使孢子數(shù)降低一個對數(shù)單位所需時刻并不受孢子初始濃度的影響。
4         脈動真空滅菌器的驗證
脈動真空滅菌器的驗證內(nèi)容shou要有裝置承認、運轉(zhuǎn)承認及功能承認。
4.1  裝置承認
(1)查看及掛號設備的廠商稱號，設備稱號、類型、生產(chǎn)廠商編號及生產(chǎn)日期，公司內(nèi)部設備掛號號；(2)裝置地址及裝置情況是不是契合G家有關(guān)壓力容器的請求；(3)設備規(guī)范規(guī)范是不是契合規(guī)劃請求；(4)計量、外表的精確性和精確性；(5)設備相應的共用工程和建筑設備的配套，如電源、真空體系、壓縮空氣體系、冷卻水等銜接是不是契合供貨單位提出的請求；(6)各種附件和備品（如壓力表、安全閥、電磁閥等）的規(guī)范、類型是不是核對和掛號；(7)擬定清洗規(guī)程及記載格局；(8)制定校對、保護養(yǎng)護及運轉(zhuǎn)的SOP草案及記載表格局草案。#p#分頁標題#e#
4.2  運轉(zhuǎn)承認
(1)蒸汽壓力和溫度在設定的規(guī)模內(nèi)；(2)滅菌器門的聯(lián)鎖體系安全可靠；(3)滅菌器正常運轉(zhuǎn)所需的各種操作規(guī)程是不是樹立；(4)溫度監(jiān)控設備的挑選和校驗契合滅菌程序請求。
合格規(guī)范：滅菌器的各步程序運轉(zhuǎn)正常，與操作闡明書相符，無顯著誤差；全部運轉(zhuǎn)中，無反常噪聲呈現(xiàn)。
4.3  功能承認
4.3.1  熱散布實驗
熱散布實驗是驗證滅菌器不一樣方位的溫度均一性的一項shou要實驗，以搞清滅菌過程中腔室內(nèi)各個不一樣方位的溫差情況，為下一步熱穿透實驗提供依據(jù)。它包含空載熱散布實驗、滿載(80%裝載量)熱散布實驗。
4.3.1.1  熱散布實驗過程
(1)選用10～20個熱電偶或熱電阻作溫度探頭,編號，將其固定在滅菌器腔室的不一樣方位并用特氟龍密封帶和硅膠密封在滅菌器內(nèi)溫度探頭的裝置方位，應包含也許的高溫點(如蒸汽入口處)及低溫點(如冷凝水排放口)，別的有一只探頭置于滅菌器溫度操控探頭處，一只探頭置于滅菌器溫度記載操控探頭鄰近，其余則均勻散布于滅菌器腔室內(nèi)，以使溫度的監(jiān)測具有代表性。在滿載熱散布實驗中，裝載應盡也許運用待滅菌商品或類似物并留意不要將溫度探頭接入待滅菌的容器中，而應在其周圍；(2)按初步設定的滅菌程序、滅菌參數(shù)及裝載方法進行滅菌；(3)每種裝載方法**少應進行3次重復性實驗，對實驗取得的數(shù)據(jù)進行收拾剖析，并在此基礎(chǔ)上斷定裝載的冷點方位；(4)實驗前后都要將溫度探頭放入冰點槽和油浴里校對；(5)一般可在幾回空載實驗斷定出冷點方位后，進行**大和**小的裝載實驗；(6)對實驗數(shù)據(jù)作統(tǒng)計剖析，**冷點和腔室均勻溫度間差值不得超越±2.5 ℃，否則闡明設備功能差或存在某種毛病，形成此不良情況的要素在于規(guī)劃、裝置、裝載方法或操控手段存在缺點，應加以改進。
4.3.1.2 熱散布實驗可接受的規(guī)范
(1)空載熱散布滅菌室的溫度均勻性≤±1 ℃；(2)滿載熱散布滅菌室的溫度均勻性≤±1.5 ℃；(3)溫度操控的規(guī)模,依據(jù)設備的精度自訂。
4.3.2  熱穿透實驗
熱穿透實驗是驗證滅菌器及滅菌程序?qū)ι唐愤m用性的一項實驗，目的是斷定滅菌室裝載中的“**冷點”，并承認該點在預訂的滅菌程序中取得滿足的無菌確保值。
4.3.2.1  熱穿透實驗的過程及請求
熱穿透實驗的過程及請求與滿載熱散布實驗大體一樣，shou要不一樣在于溫度探頭放置方法上，熱穿透實驗請求溫度探頭應當刺進待滅菌商品中，插有溫度探頭的商品應放在以下方位: (1)熱散布實驗斷定的**冷點方位；(2)蒸汽入口處或熱散布實驗斷定的別的高溫點方位；(3)滅菌器溫度操控探頭鄰近；(4)溫度記載探頭處(假如滅菌器的溫度自動操控和溫度記載不是共用溫度探頭時)；(5)另需有記載腔室溫度的探頭,此探頭不刺進商品中,方位在溫度操控探頭鄰近。
熱穿透實驗**少需重復進行3次，實驗前后都要將溫度探頭放入冰點槽和油浴里校對。4.3.2.2  熱穿透實驗可接受規(guī)范
(1)對于滅菌程序物品,裝載中各點所得到的**小F0值應大于8 min；(2)**小F0值與均勻F0值的差值應不大于2.5%。
4.3.3  生物指示劑驗證實驗
對熱穿透實驗成果進行統(tǒng)計剖析可得出滅菌程序的運轉(zhuǎn)參數(shù)，進而斷定所用滅菌器對某一物品的滅菌程序。然后還要進行生物指示劑驗證實驗，行將一定量已知D 值的耐熱孢子接入被滅菌的物品中，在預訂的滅菌條件下滅菌，以驗證設定的滅菌技術(shù)是不是真正能賦予物品所需的規(guī)范滅菌時刻F0值。
4.3.3.1  生物指示劑的耐熱性
蒸汽壓力滅菌程序驗證，常用的生物指示劑有嗜熱脂肪芽孢桿菌Bacillus stereathernophilus, 其常規(guī)微生物耐熱參數(shù)D121 ℃值為1.5～3.0 min。因為同一生物指示劑在不一樣介質(zhì)或載體上的耐熱性不一樣，所以在實驗前要測定生物指示劑在待滅菌物品中的耐熱性，并依據(jù)其耐熱性斷定驗證時所要接種的孢子數(shù)量，或是不是需求選用一種規(guī)范溶液來代替某物品作為生物指示劑的介質(zhì)。
4.3.3.2 生物指示劑的裝載
為了精確反映滅菌程序?qū)ξ锲返臏缇饔茫镏甘緞┮话惚唤臃N入被驗證物品的包裝容器中，如生物指示劑與被驗證物品不相容，可用pH值及粘度與物品類似的介質(zhì)，生物指示劑驗證可與熱穿透實驗一起進行，裝有生物指示劑的容器要緊挨著裝有測溫探頭的容器，在滅菌設備的**冷點處有必要放置生物指示劑，冷點一般坐落蒸汽或冷凝水出入口鄰近，為便于精確剖析驗證實驗成果，一切的生物指示劑與測溫探頭的放置應有相對應的編號。
4.3.3.3 生物指示劑驗證合格規(guī)范
經(jīng)生物指示劑驗證后可證實在設定的滅菌程序或F0條件下，物品的無菌確保水平低于10-6。